期刊论文

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湖南畜牧兽医

1006-4907

2023

02

30-36

10.3969/j.issn.1006-4907.2023.02.013

:国家级大学生创新创业训练计划项目 2021JJ30060:湖南省自然科学基金面上项目 21A0442:湖南省教育厅科学研究项目 2021NK2026:湖南省重点研发计划 2022ZYC091:中央引导地方科技发展资金项目

本校为第一机构

(目的)研究旨在克隆猪CD163 （pCD163）基因、体外表达CD163蛋白。（方法）采用RT-PCR扩增猪CD163基因，运用生物信息学软件分析其核苷酸和编码氨基酸序列，将猪CD163的两个截短基因片段（1-1749 bp和1717-3348 bp）克隆至原核表达载体pGEX-4T-1，构建重组原核表达载体，转化Transetta（DE3）菌株，IPTG诱导蛋白表达，采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。（结果）结果表明，pCD163开放阅读框为3348 bp（GenBank:OM321546），编码1116 aa，蛋白分子量为120.5 kDa，该基因与已经测定的人、绿猴、牛、狼的CD163的核苷酸相似性依次为87.8%、88%、87.4%和88%,pCD163基因与抹香鲸和牛的CD163基因...