期刊论文

中文

湖南畜牧兽医

1006-4907

2023

05

30-36

10.3969/j.issn.1006-4907.2023.05.009

202210546002:国家级大学生创新创业训练计划项目 2021NK2026:湖南省重点研发计划 2022JJ30098:湖南省自然科学基金项目 :动物微生物新型检测技术及生物制剂衡阳市重点实验室

本校为第一机构

为制备高致病性的TGEV毒株重组S蛋白,试验将重组质粒pET28a-TGEV-S2、pET28a-TGEV-S3,转化至E. coli BL21(DE3)表达菌株,设置不同的诱导温度、IPTG浓度和诱导时长对其进行表达条件的优化,并使用纯化试剂盒将其纯化,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果表明,重组TGEV毒株S蛋白的分子量分别约为28 kDa、30 kDa,在不同诱导条件下均以包涵体形式存在,在28℃条件下以终浓度为1 mmoL·L-1 IPTG诱导4 h表达量达到最高。结果表明:试验成功制备了TGEV重组S蛋白,为TGEV抗体检测试剂盒和基因工程疫苗、检测试剂的研究奠定了基础。