期刊论文

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湖北农业科学

0439-8114

2020

59

15

108-113

10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2020.15.021

湖南省教育厅优秀青年项目（17B041）； 校企合作项目“仔猪腹泻性疾病卵黄抗体制剂的研制”（ZXXQ201701）、“仔猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和致病性大肠杆菌三价抗体的研究”（18H03）； 衡阳师范学院青年英才支持计划专项（16D20）；

本校为第一机构

为了得到较优的卵黄抗体提取工艺,试验改良了辛酸法、水稀释法、氯仿法、硫酸铵沉淀法与聚乙二醇沉淀法5种提取方法。IPGT诱导表达重组猪致病性大肠杆菌（Escherichia coli）毒素STxB蛋白（rSTxB）,与佐剂71VG乳化制备免疫原免疫蛋鸡,利用改良的聚乙二醇沉淀法提取高免卵黄抗体,采用SDS-PAGE电泳检测抗体纯度,通过Western blot检测卵黄抗体和血清抗体效价。结果表明,辛酸法、水稀释法、氯仿法、硫酸铵沉淀法、聚乙二醇沉淀法提取效率分别为96.00、81.99、155.50、65.34、46.00 mg/mL,其中聚乙二醇沉淀法的提取纯度最高。重组STxB蛋白分子量大小约25 kDa,血清中抗体效价最高达到64 000倍,卵黄抗体...