期刊论文

Isolation and Culture of a Porcine Adenovirus Type 3 Strain and Preparation of Polyclonal Antibody Against Its fiber Protein

中文

中国畜牧兽医

1671-7236

2021

48

02

619-630

10.16431/j.cnki.1671-7236.2021.02.024

湖南省教育厅优秀青年项目（17B041）； 校企合作项目（ZXXQ201701、18H03）； 衡阳师范学院***专项项目（16D20）；

本校为第一机构

本研究旨在对临床1份腹泻病料进行病原的分离培养并探究该病原编码的主要抗原蛋白的生物学特点。采用巢式PCR检测病料猪腺病毒3型（Porcine adenovirus type 3,PADV3）核酸并进行病毒分离培养,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法（IPMA）进行病毒血清学鉴定,PCR扩增fiber基因,将其ORF区克隆至pET-28a（+）载体并转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,IPTG诱导重组fiber蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组蛋白,将纯化的重组蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体并测定抗体免疫活性。结果表明,病料为PADV3核酸阳性,感染ST细胞产生典型的"葡萄串"细胞病变效应（CPE）,P5～P11代次中的PADV3核酸稳...