一种喹诺酮纳米分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）固相载体玻璃珠上引入抗生素将250 ~ 300 g玻璃珠加入到120 ~ 160 mL、1 ~ 4 mol/L的NaOH水溶液中，加热沸腾10 ~ 15分钟，取出玻璃珠用水洗至洗液的pH=8 ~ 9，烘干得到羟基化玻璃珠；将羟基化玻璃珠加入到150 mL干甲苯中，再加入3 mL3‑胺丙基三甲氧基硅烷，剧烈摇动后，室温下放置12 ~16小时，过滤、丙酮冲洗，得到硅烷化玻璃珠；在20 mL乙腈和80 mL pH 6.0 PBS缓冲溶液中，加入80 ~120 mg 喹诺酮类抗生素、80~100 mg 1‑乙基‑3‑（3‑二甲基氨基丙基）‑碳二亚胺盐酸盐 和120 ~150 mg N‑羟基琥珀酰亚胺，室温放置10~15分钟后倒入100 g上述硅烷化玻璃珠中，加1 mol/L的NaOH水溶液调节反应液pH至7.4，室温下反应2 ~ 3 h，抽滤，水洗，干燥，收集喹诺酮抗生素衍生玻璃珠；（2）合成喹诺酮类抗生素印迹的纳米印迹聚合物将8.0 ~ 10.0 mmol甲基丙烯酸、4.0 ~ 5.0 mmol乙二醇二甲基丙烯酸酯、3.0 ~3.5 mmol三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、1.0 mmol二乙基二硫代氨基羧酸苄酯和0.1 ~ 0.15 mmol四（3‑巯基丙酸）季戊四醇酯溶于10g的乙腈中，得到混合溶液，并所述混合溶液中通氮气20分钟；取25 ~ 30g所述喹诺酮类抗生素衍生玻璃珠于平底杯中，往烧杯中通氮气20分钟；将所述混合溶液倒入上述烧杯中，紫外照射1~3分钟，得到反应混合物；将所述反应混合物倒入至固相萃取管中，用6 ~ 8床的冷乙腈洗涤玻璃珠，得到半成品玻璃珠，通氮气10分钟；取220 ~ 270 mg PEG 4000 溶于8 mL乙腈中，通氮气5分钟后，倒入上述半成品玻璃珠表面，摇动混匀，紫外照射1~3分钟，将所述反应混合物倒入至固相萃取管中，用6 ~ 8床的冷乙腈洗涤玻璃珠，然后用100 mL、60 ~ 70℃乙腈淋洗，得到喹诺酮类抗生素印迹的纳米分子印迹聚合物溶液，自然冷却至室温，用微孔超离心过滤器离心分离得到喹诺酮类抗生素纳米分子印迹聚合物溶液。
