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犬ELF4基因原核表达及其卵黄抗体的制备

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成果类型:
期刊论文
作者:
喻娇;曹馨;唐青海;侯鑫军;高翠翠;...
作者机构:
[唐青海; 黎露; 高翠翠; 侯鑫军; 唐斯萍; 刘会敬; 韩涛涛; 曹馨; 喻娇] 衡阳师范学院生命科学与环境学院/南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室/动物微生物新型检测技术及生物制剂衡阳市重点实验室,湖南衡阳 421008
语种:
中文
关键词:
犬ELF4蛋白;原核表达;真核表达;佐剂;卵黄抗体
期刊:
南方农业学报
ISSN:
2095-1191
年:
2022
卷:
53
期:
8
页码:
2359-2372
基金类别:
202110546001:国家级大学生创新创业训练计划项目 2021JJ30060:湖南省自然科学基金面上项目 21A0442:湖南省教育厅科学研究项目 2021NK2026:湖南省重点研发计划项目
机构署名:
本校为第一机构
院系归属:
生命科学与环境学院
摘要:
【目的】克隆犬转录因子ELF4基因(cELF4),体外表达重组c ELF4蛋白(rcELF4)并制备抗该蛋白的卵黄抗体(IgY),为深入探究犬ELF4蛋白功能提供基础材料。【方法】采用RT-PCR扩增cELF4基因,将目的基因克隆至pMD19-T载体构建重组质粒并测序,运用生物信息学软件分析其核苷酸序列及编码的氨基酸序列特征。将c ELF4基因克隆至原核表达载体pET-28a,构建重组表达质粒pET28a-cELF4,分别转化大肠杆菌BL21(DE3)和Rosetta(DE3)感受态细胞,诱导表达后对表达产物进行SDS-PAGE检测和Western blotting鉴定。将rcELF4蛋白分别与3种免疫佐剂(ISA 15AVG、ISA 71VG、ISA 201VG)乳化制备免疫原,通过免...

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