人抗凝血酶Cys248位点突变体的构建与真核表达
作者：
杨海;王芳宇;李青旺;胡建宏;董潇潇;...
期刊：
西北农林科技大学学报(自然科学版),2013年41(10):32-36 ISSN：1671-9387
作者机构：
[杨海; 王芳宇; 董潇潇] 衡阳师范学院生命科学系;[李青旺; 胡建宏] 西北农林科技大学动物科技学院;[单永红] 南岳生物制药有限公司产品研发部
关键词：
反向PCR;人抗凝血酶;定点突变;真核表达
摘要：
[目的]建立一种对人抗凝血酶(AT)Cys248位点进行定点突变和真核表达的可靠方法,为突变体的结构和功能研究提供原始材料。[方法]以人AT cDNA序列为模板,设计1对反向扩增引物,进行反向PCR反应;PCR产物经连接、测序后,克隆至表达质粒pcDNA3.1(+)-GFP上,构建重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-mAT-GFP;用重组载体介导突变基因在山羊乳腺上皮(GME)细胞内表达,收集细胞培养上清液进行表达产物的定性、定量检测。[结果]突变基因经测序证实与预期结果一致,且在GME细胞内得到高效表达,细胞培养液上清中的突变体质量浓度为(526±17.3) mg/L。[结论]反向PCR法是对-AT基因进行定点突变的可靠方法,AT-突变基因在GME细胞内可高效表达。
语种：
中文
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HSP90表达与牛精子抗冻性研究进展
作者：
杨海;王春伟;贾永宏;胡建宏;李青旺
期刊：
家畜生态学报,2012年33(05):109-111 ISSN：1673-1182
作者机构：
衡阳师范学院生命科学系;西北农林科技大学动物科技学院;[贾永宏] 陕西省家畜改良站;[李青旺; 王春伟; 胡建宏] 西北农林科技大学;[杨海] 衡阳师范学院
关键词：
热应激蛋白HSP90;表达量;抗冻性;牛精子
摘要：
热应激蛋白(HSPs)是生物体抵抗温度升高、氧化刺激和缺氧等环境变化时广泛合成的一组蛋白.论文简述了冷冻—解冻后精子蛋白质含量变化的研究进展以及热应激蛋白HSP90表达量对牛冷冻精液质量影响的机理,为提高牛精液冷冻品质提供理论参考.
语种：
中文
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地方院校生物专业校外实践教学基地建设的探索与实践——以衡阳师范学院为例
作者：
杨海;雷海玲;王芳宇
期刊：
安徽农业科学,2012年40(34):16946-16948 ISSN：0517-6611
作者机构：
衡阳师范学院生命科学系,湖南衡阳,421008;衡阳师范学院科技处,湖南衡阳,421008;[雷海玲; 王芳宇; 杨海] 衡阳师范学院
关键词：
地方院校;生物专业;校外实践教学基地;建设
摘要：
扩招政策的执行以及有限的政府投入致使地方院校生物专业实践教学资源不足，严重制约了人才培养质量的提高，因此，建设校外实践教学基地对于地方院校的发展具有战略意义。以衡阳师范学院为例，从校外实践教学基地建设的作用，校外实践教学基地建设存在的问题，以及加强实践教学基地建设的举措等方面，对地方院校生物专业校外实践教学基地建设进行了总结和反思，旨在为地方院校建设生物专业校外实践教学基地提供参考。
语种：
中文
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哺乳动物性别决定与性别控制研究进展
作者：
杨海;胡建宏;李青旺
期刊：
广东农业科学,2012年39(18):144-147 ISSN：1004-874X
作者机构：
[杨海] 衡阳师范学院生命科学系;[胡建宏; 李青旺] 西北农林科技大学动物科技学院
关键词：
哺乳动物;性别决定;性别控制;研究进展
摘要：
哺乳动物的性别和某些经济性状有着直接或间接的联系,因此哺乳动物性别控制对于畜牧生产具有十分重要的意义。性别控制技术以哺乳动物性别决定机制为基础,近年来取得了较大进展。以哺乳动物性别决定机制、性别控制的途径以及性别控制技术在畜牧生产中的应用为主要内容,对哺乳动物性别决定与性别控制的研究进展进行了综述,旨在为哺乳动物性别决定和性别控制研究提供参考和帮助。
语种：
中文
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3种中草药方剂对家兔精液及精子品质的影响
作者：
杨海;彭凤;胡建宏;李青旺
期刊：
西北农林科技大学学报(自然科学版),2012年40(12):15-19 ISSN：1671-9387
作者机构：
[杨海; 彭凤] 衡阳师范学院生命科学系;[胡建宏; 李青旺] 西北农林科技大学动物科技学院
关键词：
中草药方剂;家兔;精液品质;精子品质
摘要：
【目的】研究3种中草药方剂对家兔精液和精子品质的影响。【方法】选取8~10月龄新西兰雄兔共40只,随机分为A、B、C 3个试验组和1个对照组,每组10只,3个试验组对应饲喂添加A、B、C 3种不同中草药方剂的日粮,剂量均为10 g/(只·d),连续用药20 d,于用药7 d和停药20 d后采集家兔精液,检测中草药方剂对家兔精液和精子品质的影响。【结果】用药7 d后,试验组家兔的射精量、精子密度和精子活率极显著高于对照组(P<0.01),且A组极显著高于B组和C组(P<0.01);停药20 d后,试验组家兔的射精量、精子密度、精子活率接近对照组水平,两者之间无显著差异(P>0.05);试验组家兔的精子顶体完整率、质膜完整率、染色质正常率在组间和组内差异均不显著(P>0.05)。【结论】3种中草药方剂在用药期内均可显著提高家兔的精液品质,其中方剂A在家兔生产中具有推广应用价值。
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地方高校科研管理中的问题分析及改进措施
作者：
雷海玲;杨海
期刊：
教育教学论坛,2012年(35):257-258 ISSN：1674-9324
作者机构：
衡阳师范学院科技处,湖南衡阳,421008;衡阳师范学院生命科学系,湖南衡阳,421008
关键词：
地方高校;科研管理;过程管理;评价执制
摘要：
高校科研管理作为科研活动的一个重要环节,对高校科研水平有着重要的影响。本文就地方高校科研管理工作的现状进行分析,提出促进高校科研管理工作的有效措施,以期对地方高校的科研管理工作有所助益。
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6个不同品种公牛与湘西黄牛杂交F_1代的生长发育性状
作者：
杨海;彭凤;刘超;易遵刚;王智萍
期刊：
西北农业学报,2012年21(11):14-18 ISSN：1004-1389
作者机构：
[杨海; 彭凤] 衡阳师范学院生命科学系;[刘超; 易遵刚; 王智萍] 湘西自治州畜牧水产局
关键词：
湘西黄牛;经济杂交;F_1代;生长发育性状
摘要：
选用6个不同品种的公牛(三河牛、秦川牛、安格斯牛、短角牛、西门塔尔牛、夏洛来牛)与湘西黄牛实行经济杂交,随机抽取各杂交方式初生犊牛10头共60头组成试验组,抽取湘西黄牛初生犊牛10头组成对照组,对犊牛各阶段的体质量、日增体质量及体尺进行统计分析。结果表明,试验组犊牛的体质量、日增体质量、体斜长、胸围均优于对照组(P <0.05);各生长阶段以6~12月龄增量最快,均超过1 kg/d;试验组犊牛的体高、管围与对照组差异不显著(P >0.05)。国外品种夏洛来牛、西门塔尔牛是湘西黄牛经济杂交的优势父本,国内品种秦川牛是湘西黄牛经济杂交的优势父本,杂交F_1代育肥牛12月龄后出栏为宜。
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High level expression of recombinant human antithrombin in the mammary gland of rabbits by adenoviral vectors infection
作者：
Yang, Hai;Li, QingWang*;Han, ZengSheng;Hu, JianHong
期刊：
Animal Biotechnology,2012年23(2):89-100 ISSN：1049-5398
通讯作者：
Li, QingWang
作者机构：
[Yang, Hai; Hu, JianHong; Li, QingWang] NW A&F Univ, Coll Anim Sci, Yangling 712100, Shaanxi Provinc, Peoples R China.;[Yang, Hai] Hengyang Normal Univ, Dept Life Sci, Hengyang, Hunan, Peoples R China.;[Li, QingWang; Han, ZengSheng] Yanshan Univ, Coll Environm & Chem Engn, Dept Biol Engn, Qinhuangdao, Hebei Province, Peoples R China.
通讯机构：
[Li, QingWang] N;NW A&F Univ, Coll Anim Sci, Yangling 712100, Shaanxi Provinc, Peoples R China.
关键词：
Adenovirus vector;Infection;Mammary gland;Rabbit;Recombinant human antithrombin
摘要：
Expression of recombinant pharmaceutical proteins in the mammalian mammary gland is of great interest for the medical industry. This study was designed to express recombinant human antithrombin (rhAT) in the mammary gland of rabbits by adenovirus vectors infection. Replication-defective adenovirus encoding human antithrombin complementary DNA (cDNA) was constructed and directly infused into the mammary gland of rabbits via the teat canal. The milk serum was collected from the infected mammary gland 48h post-infection and subjected to Western blot analysis, Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and antithrombotic activity assay. In this way, the target protein was verified, and a high expression level of rhAT up to 4.8g/L was obtained, and antithrombotic activity of the rhAT was not different than that of a standard human antithrombin protein (p>0.05). Compared to previous attempts to produce human antithrombin in the mammary gland of transgenic animals or fractionation the plasma of blood donors, the method for rhAT expression we established would reduce production cost and further increase production efficacy. © 2012 Copyright Taylor and Francis Group, LLC.
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英文
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二聚有机锡配合物[(n-Bu)_2Sn(H_2O)C_5H_3N(CO_2)_2]_2的合成、结构和量子化学研究
作者：
张志坚;邝代治;张复兴;王剑秋;杨海
期刊：
计算机与应用化学,2012年29(4):454-456 ISSN：1001-4160
作者机构：
[张志坚; 杨海] 衡阳师范学院生命科学系;[邝代治; 张复兴; 王剑秋] 衡阳师范学院化学与材料科学系
关键词：
有机锡配合物;合成;晶体结构;量子化学
摘要：
吡啶-2,6-二甲酸与(n-Bu)_2SnO反应合成标题化合物,并经元素分析、IR和X-射线衍射表征,该配合物晶体属四方晶系,空间群P42/n,晶胞参数:a=1.77103(6)nm,b=1.77103(6)nm,c=1.11717(7)nm,α=90°,β=90°,γ=90°,V=3.5041(3)nm~3,Z=4,Dc=1.577g/cm~3,μ(MoKα)=1.479mm~(-1),F(000)=1680andR_1=0.0329,wR_2=0.0852[对I>2σ(I)的衍射]和R_1=0.0428,wR_2=0.0937(对所有的衍射)。共收集12600个数据,其中独立衍射点3431个,可观察衍射[I>2σ(I)]点2723个用于结构精修。中心Sn原子形成七配位变形十面体,分子间通过氧原子的氢键作用形成三维网络结构。利用量子化学G98W软件,在Lanl2dz基组对化合物的稳定性、前沿分子轨道组成及能量进行研究。
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中文
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实时精子分离系统对猪精子冷冻品质的影响
作者：
杨海;李青旺;胡建红;张树山
期刊：
西北农林科技大学学报(自然科学版),2011年39(10):53-57 ISSN：1671-9387
作者机构：
西北农林科技大学动物科技学院;衡阳师范学院生命科学系;[张树山] 上海市农业科学院畜牧兽医研究所;[李青旺; 胡建红; 杨海] 西北农林科技大学
关键词：
实时精子分离系统;猪;精子;精液冷冻;精液品质
摘要：
【目的】探索实时精子分离系统对猪精子冷冻品质的影响。【方法】采用实时精子分离系统对精液进行分离优选,液氮冷冻法制作细管冻精,以未分离精液为对照,检测实时精子分离系统对猪精子冷冻品质的影响。【结果】分离优选精子解冻后,精子活率、顶体完整率、质膜完整率、正常染色质率均明显高于对照组（P〈0.01）;分离组精子的正常形态率也显著高于对照组,且未受冷冻-解冻过程的影响（P〉0.01）;分离过程对精子密度也未产生显著影响（P〉0.01）。【结论】实时精子分离系统可以显著改善猪冷冻精液的品质。
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