作者： 文贵辉;杨海;刘增再

期刊： 中国饲料,2019年(22):77-80 ISSN：1004-3314

作者机构： [文贵辉] 湖南环境生物职业技术学院;[杨海] 衡阳师范学院;[刘增再] 长沙市动物疫病预防控制中心

关键词： 灵芝;多糖;育肥猪;生长性能;血液指标

摘要： 文章旨在评价灵芝细胞外多糖(EPG)对育肥猪生长性能和血液指标的影响。试验选择100头体重为(53.13±0.46)kg的生长猪,随机分为4组,试验1、2、3组分别在对照组基础饲粮的基础上添加0.1%、0.2%、0.3%的EPG,试验分为两个阶段,分别持续35 d。试验结果 :与对照组相比,EPG处理对育肥猪体重无显著影响(P> 0.05)。在0~35 d阶段,EPG处理组生长性能无显著变化(P> 0.05);35~70 d阶段,试验1、2、3组育肥猪ADG分别显著增加7.2%、9.5%、8.3%(P <0.05),在整个试验期间,试验2组ADG显著增加7.4%(P <0.05),其余生长指标与对照组无显著差异(P> 0.05)。此外,与对照组相比,试验1、2、3组育肥猪血浆中IgG浓度分别增加20.1%、36.1%、25.5%(P <0.05),IL-2浓度增加16.6%、23.3%、14.4%(P <0.05),球蛋白浓度显著增加10.4%、13.0%、13.8%(P <0.05),甘油三脂浓度显著降低10.9%、28.1%、17.2%(P <0.05)。试验2、3组育肥猪血浆中白蛋白和球蛋白的比值分别较对照组降低12.4%、11.5%(P <0.05),LDL-C浓度分别显著降低12.8%、11.1%(P <0.05),试验2组血浆中总胆固醇较对照组显著降低9.2%(P <0.05)。表明饲粮中添加EPG显著促进育肥猪生长,改善血液指标和免疫功能,添加量为0.2%时效果最佳。

语种： 中文

作者： 杨灿;唐小武;欧慧敏;杨海;唐青海;...

期刊： 中国畜牧兽医,2019年46(5):1388-1396 ISSN：1671-7236

作者机构： [唐青海; 杨灿; 欧慧敏; 曹丽敏; 杨海; 唐姣玉] 衡阳师范学院;[唐小武] 湖南大北农农业科技有限公司;衡阳师范学院畜禽养殖生物工程技术研究所

关键词： 桑叶;猪;肉鸡;蛋鸡

摘要： 桑叶含粗蛋白质、维生素(维生素A、维生素C)、微量元素(铁、锰、铜、锌)等营养组分及黄酮类等多种活性成分,是理想的动物蛋白质资源。研究发现,在猪生产中,添加15%桑叶可能会影响育肥猪的生长,但添加适量的桑叶(6%左右)可延缓宰后肌肉pH降低,增强肌肉的抗氧化能力,同时,桑叶可提高肌肉脂肪沉积,对肌肉氨基酸和脂肪酸组成(增加不饱和脂肪酸的含量)均有影响,并改善肉的风味。在家禽生产中,添加桑叶能降低鸡肉的pH,且可通过改变肌肉脂肪酸组成改善肉品质。此外,桑叶的活性成分已被证实能提高细胞或小鼠的抗氧化能力,具有降血脂、血糖及动脉粥样硬化等作用。本文简述了桑叶的营养价值及其在猪、肉鸡、蛋鸡生产中的应用,旨在为其作为蛋白质资源进一步应用于畜禽生产提供一定参考。

语种： 中文

作者： 吴思雯;胡聪;唐青海;韩涛涛;刘祯珍;...

期刊： 中国畜牧兽医,2019年46(6):1764-1773 ISSN：1671-7236

作者机构： 衡阳师范学院生命科学与环境学院,衡阳师范学院畜禽养殖生物工程技术研究所,生物资源保护与利用衡阳市重点实验室,衡阳421008;[唐青海; 李彦; 吴思雯; 胡聪; 王芳宇; 向冬梅; 韩涛涛; 杨海; 王姝姝; 刘祯珍] 衡阳师范学院

关键词： 猪腺病毒3型(PADV3);Protease基因;表达;多克隆抗体

摘要： 试验旨在研究猪腺病毒3型(PADV3) Protease蛋白在大肠杆菌中的表达,并制备该蛋白的多克隆抗体.利用PCR扩增PADV3 Protease基因,构建重组原核表达载体pET28a-PADV3-Protease和真核表达载体pEGFP-PADV3-Protease,采用双酶切和测序鉴定;将原核表达载体pET28a-PADV3-Protease转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞得到重组原核表达菌株,经IPTG诱导收集蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting鉴定,将目的蛋白纯化后与佐剂乳化制备免疫原免疫家兔,制备Protease蛋白多克隆抗体;将真核表达载体pEGFP-PADV3-Protease转染HEK293细胞经G418筛选建立稳定表达EGFP-Protease融合蛋白的细胞系,以该稳定表达细胞系为包被抗原,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测抗体的免疫活性与抗体滴度.结果 显示,Protease基因开放阅读框(ORF)为615 bp,原核表达系统中Protease蛋白以包涵体形式存在,分子质量大小为23 ku,与真核细胞表达的Protease蛋白分子质量一致,该蛋白在细胞核与细胞质中均有分布,制备的Protease蛋白多克隆抗体能与EGFP-Protease融合蛋白稳定表达真核细胞系发生特异性的反应,与对照细胞无反应.本试验构建了Protease蛋白原核表达菌株和真核表达细胞株,制备的PADV3-Protease蛋白多克隆抗体免疫活性良好,为进一步研究Protease蛋白的生物学功能和PADV3的血清学诊断提供了基础材料.

语种： 中文

作者： 文贵辉;杨海;刘增再

期刊： 中国饲料,2019年(16):40-43 ISSN：1004-3314

作者机构： [文贵辉] 湖南环境生物职业技术学院;[杨海] 衡阳师范学院;[刘增再] 长沙市动物疫病预防控制中心

关键词： 断奶仔猪;紫花苜蓿多糖;生长性能;肠道形态;发育

摘要： 文章旨在评价饲粮中添加紫花苜蓿多糖对仔猪生长性能及小肠形态的影响。试验选取100头体重接近的28日龄断奶仔猪,随机分为对照组和试验1、2、3组,适应期7 d,期间饲喂基础饲粮,正式试验时试验组分别在对照组基础饲粮中添加0.025%、0.05%、0.075%的紫花苜蓿多糖,处理42 d。结果发现,紫花苜蓿多糖处理组仔猪平均末重、ADG显著提高（P <0.05）,FCR降低（P <0.05）,而ADFI无显著变化（P> 0.05）。相比于对照组,试验1、2、3组仔猪平均末重分别增加7.8%、11.6%、10.2%（P <0.05）,ADG分别增加12.4%、18.2%、15.9%（P <0.05）,FCR显著降低10.1%、12.5%、10.2%（P <0.05）。同时,饲粮中添加紫花苜蓿多糖显著改变小肠肠道形态,相比对照组,试验2、3组仔猪十二指肠V/C分别降低8.9%、7.7%（P <0.05）;试验2、3组仔猪空肠VH分别增加8.3%、7.0%（P <0.05）,CD分别降低8.8%、7.7%（P <0.05）,试验1、2、3组V/C分别增加7.6%、18.8%、15.9%（P <0.05）。除此之外,试验2、3组仔猪回肠VH较对照组分别增加9.4%、6.2%（P <0.05）,CD分别降低10.0%、9.6%（P <0.05）,试验1、2、3组V/C分别增加10.4%、21.5%、17.5%（P <0.05）。结果表明,饲粮中添加紫花苜蓿多糖显著改善仔猪小肠形态,促进其生长发育,添加量为0.05%时效果最佳。

语种： 中文

作者： 易程;邓莉;唐青海;阳坤;滕威;...

期刊： 中国动物检疫,2019年36(2):82-87 ISSN：1005-944X

作者机构： 衡阳师范学院生命科学与环境学院,衡阳师范学院畜禽养殖生物工程技术研究所,衡阳师范学院生物药物研究所,湖南衡阳421008;[何丽芳; 唐青海; 谢璇; 滕威; 王芳宇; 阳坤; 邓莉; 杨海; 易程] 衡阳师范学院

关键词： 犬腺病毒;分离鉴定;免疫过氧化物酶单层细胞染色法

摘要： 为给I型犬腺病毒（CAV-I）后续研究提供基础材料,采集疑似犬传染性肝炎患犬粪便,用PCR方法进行CAV-I核酸检测,并运用犬肾传代细胞（MDCK）进行病毒分离培养,采用PCR和免疫过氧化物酶单层细胞染色法（IPMA）检测病毒在细胞内的繁殖状态。结果显示:患犬粪便样品PCR检测为CAV-I核酸阳性,病料接种MDCK细胞培养24 h后出现明显的"葡萄串样"细胞病变效应（CPE）;培养物血清学鉴定为CAV抗原阳性,不同代次病毒培养物均为CAV-I核酸强阳性;第9代病毒核酸序列与Gen Bank中CAV-I毒株核苷酸相似性在99.0%以上,与CAV-Ⅱ相似性仅为65.3%;该病毒与CAV-I毒株处于同一遗传分支;病毒接种MDCK后8 h内均无抗原检出,12 h后细胞核中分布大量的CAV抗原,24 h后细胞出现典型的"葡萄串样"病变,抗原在细胞中呈弥散分布。上述结果表明,分离到的毒株为CAV-I,命名为CAV-ZY180711。

语种： 中文

作者： 黎露;韩涛涛;吴思雯;唐青海;杨海;...

期刊： 中国动物检疫,2018年35(9):77-80 ISSN：1005-944X

作者机构： 衡阳师范学院生命科学与环境学院生物技术重点实验室,湖南衡阳,421008;[何丽芳; 唐青海; 黎露; 吴思雯; 王芳宇; 韩涛涛; 张倩; 杨海; 刘最] 衡阳师范学院

关键词： 猪伪狂犬病毒;分离培养;免疫过氧化物酶单层细胞染色法

摘要： 为确诊衡阳市某猪场育肥猪发生的疑似猪伪狂犬病(PR)疫情,采集发病猪脾脏,运用PCR方法进行猪伪狂犬病病毒(PRV)核酸检测,利用非洲绿猴肾细胞(Vero)进行病毒分离培养,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)进行病毒血清学鉴定;用分离培养物进行家兔感染试验,观察临床症状和病例剖检变化,采用PCR检测各器官中的病毒分布情况.结果显示:病料接种Vero细胞培养3 d后,出现明显的细胞病变效应(CPE);分离培养的病毒与PRV阳性血清呈阳性反应;家兔感染后出现奇痒等神经症状并死亡,其肝、脾组织均为PRV gE核酸检测阳性.试验结果证实,分离到的病毒为PRV野毒,从而确诊了该疑似疫情.

语种： 中文

作者： 邓莉;阳坤;唐青海;吴思雯;韩涛涛;...

期刊： 湖南畜牧兽医,2018年(06):17-21 ISSN：1006-4907

作者机构： 衡阳师范学院 畜禽养殖生物工程技术研究所/生命科学与环境学院,湖南衡阳,421008;[唐青海; 谢璇; 吴思雯; 滕威; 王芳宇; 韩涛涛; 阳坤; 邓莉; 杨海; 易程] 衡阳师范学院

关键词： PRRSV;ORF5;RT-PCR

摘要： 运用实验室分子诊断技术对湖南岳阳某猪场一例疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染病例进行确诊,测定并分析其基因序列,为猪蓝耳病的防控提供依据。采集病猪淋巴组织提取RNA,采用逆转录—聚合酶链式反应（RT-PCR）检测病毒核酸,构建重组载体,经序列测定,利用DNAStar等生物信息学软件进行序列分析。结果显示,R T-PCR产物大小为657 bp,同源性比较结果显示,此毒株OR F5基因核苷酸序列与与经典美洲型毒株VR-2332的同源性为83.4%,与我国经典毒株CH-1a株的同源性为85.4%,与高致病性代表株HUN4和JXA1的同源性分别为84.5%和84.3%,与欧洲经典型毒株LV的同源性为62.8%,与GDZS2016和GD/YJ/2014的同源性分别为95.0%和95.9%。遗传进化分析表明,此毒株属美洲型毒株;美洲型毒株下分两个亚群,以近年来新流行的GDZS2016和GD/YJ/2014毒株为代表的Ⅰ亚群和以HuN4、JXA1和VR-2332等为代表的Ⅱ亚群,此毒株与GDZS2016和GD/YJ/2014等同属Ⅰ亚群。结果表明,此次病例是由美洲型PR R SV毒株感染引起,将此毒株命名为HuNYY201805。

语种： 中文

作者： 廖慧;唐青海;彭光亮;韩涛涛;曾繁荣;...

期刊： 湖南畜牧兽医,2018年(3):44-47 ISSN：1006-4907

作者机构： 衡阳师范学院生命科学与环境学院生物技术重点实验室;[彭光亮] 衡阳市超然动物医院;[曾繁荣] 衡阳市动物疫病预防与控制中心;[唐青海; 黎露; 吴思雯; 韩涛涛; 杨海; 易程; 廖慧] 衡阳师范学院

关键词： 犬瘟热病毒;胶体金;序列分析

摘要： 对一例疑似犬瘟热（CD）的病例进行诊断及治疗,分别采用胶体金试纸条检测、采用逆转录-聚合酶链式反应（R T-PCR）检测病原抗原和犬瘟热病毒（CDV）N基因序列分析。结果显示,病犬鼻分泌物经胶体金检测为CDV抗原弱阳性,RT-PCR产物大小为287 bp,此毒株N基因核苷酸序列与野毒株的核苷酸序列同源性高达96.5%~98.6%,遗传进化分析显示,该毒株与疫苗株（Onderstepoort、CDV3等）和Lederle等弱毒株不在同一分支上,而与野毒株在同一分支,说明该毒株为CDV强毒株,将此分离株命名为CDV-Hu NHY171124。采用中西结合的抗病毒治疗方案对病犬进行为期7 d的治疗,疗效不显著,病情恶化而接受安乐死。

语种： 中文

作者： 王雁灿;杨灿;唐小武;雷涵;罗露;...

期刊： 黑龙江畜牧兽医,2018年(20):157-159 ISSN：1004-7034

作者机构： 衡阳师范学院 生命科学与环境学院,湖南衡阳,421008;嘉吉饲料(长沙)有限公司,长沙,410126;[唐青海; 杨灿; 罗露; 雷涵; 杨海; 王雁灿; 唐姣玉] 衡阳师范学院;[唐小武] 嘉吉饲料长沙有限公司

关键词： 柑橘皮;粗蛋白;黑曲霉;发酵;粗脂肪

摘要： 为了改善柑橘皮的营养价值,试验以粗蛋白提高幅度为衡量标准,采用单因素试验设计探讨黑曲霉发酵柑橘皮的最适宜发酵时间、接种比例、底物组合以及水的添加量。结果表明：当底物红薯与柑橘皮添加比例为1∶1,加水10 mL,接种10%的黑曲霉孢子悬液,发酵第4天时发酵产物的粗蛋白含量最高（8.23%）,较发酵前提高了41.17%;发酵产物的粗脂肪含量从1.71%提高到2.13%,提高了24.56%。说明通过黑曲霉固态发酵可以增加柑橘皮的粗蛋白含量。

语种： 中文

作者： 唐青海;李晓蓉;杨海;黎露;陈果亮;...

期刊： 西北农林科技大学学报(自然科学版),2018年46(4):1-12 ISSN：1671-9387

作者机构： 衡阳师范学院生命科学与环境学院生物药物研究所衡阳师范学院湖南益豚生态农业有限责任公司联合研究中心, 湖南, 衡阳, 421008;中国科学院武汉病毒研究所, 湖北, 武汉, 430071;[唐青海; 杨海; 黎露; 陈果亮; 何丽芳; 刘最; 王芳宇] 衡阳师范学院生命科学与环境学院生物药物研究所衡阳师范学院湖南益豚生态农业有限责任公司联合研究中心, 湖南, 衡阳, 421008;[李晓蓉] 中国科学院武汉病毒研究所, 湖北, 武汉, 430071

关键词： 猪流行性腹泻病毒;S1蛋白;多克隆抗体

摘要： 【目的】制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)CH-HeB14毒株S1蛋白的多克隆抗体,为PEDV新流行毒株诊断试剂盒和疫苗研制提供基础材料。【方法】利用RT-PCR扩增PEDV CH-HeB14毒株S1基因,对序列特征进行生物信息学分析,用PCR将S1基因截成不同片段(S1A、S1B、S1C、S1C-1和S1C-2),分别克隆至原核表达载体pET28a,转化BL21(DE3)构建重组表达菌株;用IPTG诱导重组蛋白表达,并进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定。将表达蛋白与佐剂乳化制备免疫原免疫兔多克隆抗体,Western blotting和免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测抗体的免疫活性。【结果】 PEDV S1、S1A、S1B、S1C、S1C-1和S1C-2片段长度依次为2 079,600,600,878,549和447 bp。系统进化树表明,CH-HeB14株与2010年以来的22个新流行毒株亲缘关系较近,而与经典疫苗株CV777、attenuated DR13亲缘关系较远。成功截短表达了S1蛋白不同区段S1A、S1B和S1C-1重组蛋白(rS1A、rS1B和rS1C-1),且蛋白均以包涵体形式表达。制备了抗rS1A、rS1B和rS1C-1蛋白的多克隆抗体,其与这3种蛋白反应良好,且抗rS1A重组蛋白的多克隆抗体Western blotting效价为1∶32 000;IPMA结果显示,该抗体能与PEDV CH-HeB14毒株和经典疫苗毒株attenuated DR13均发生特异性反应。【结论】成功克隆、表达了变异毒株PEDV CH-HeB14的S1基因,所制备的S1蛋白多克隆抗体具有良好的免疫活性。

语种： 中文

作者： 唐青海;杨海;杨灿

期刊： 西部素质教育,2018年4(19):162-163 ISSN：2095-6401

作者机构： 衡阳师范学院生命科学与环境学院,湖南 衡阳,421000;[唐青海; 杨灿; 杨海] 衡阳师范学院

关键词： 师范院校;动物科学专业;师资建设

摘要： 为了提升地方师范院校动物科学专业的教学质量,文章以衡阳师范院校为例,阐述了地方师范院校开办动物科学专业背景,指出了地方师范院校动物科学专业开设的成效,提出了地方师范院校动物科学专业开办存在的问题及对策。

语种： 中文

作者： 刘倩;符潮;唐青海;杨海

期刊： 衡阳师范学院学报,2018年39(03):128-132 ISSN：1673-0313

作者机构： 衡阳师范学院 生命科学与环境学院,湖南 衡阳 421008;赣南师范大学 生命与环境科学学院,江西 赣州 341000;赣南师范大学 生命与环境科学学院,江西 赣州,341000;衡阳师范学院 生命科学与环境学院,湖南 衡阳,421008;[唐青海; 杨海; 刘倩] 衡阳师范学院

关键词： 人抗凝血酶Ⅲ;基因结构;蛋白结构;生物功能;重组表达;研究进展

摘要： 人抗凝血酶Ⅲ(Human Antithrombin,hATⅢ)是机体抗凝系统发挥其生理功能的主要因子,对血液循环、血浆渗透压平衡、止血抗凝、抗炎等机制均具有重要作用,与各种疾病的表征高度相关.该文综述了hATⅢ 的基因结构、蛋白结构、生物功能以及其重组表达等方面的研究进展,对hATⅢ 的研究进行了展望,旨在为hATⅢ 研究工作者提供参考.

语种： 中文

作者： 杨灿;唐小武;宾冬梅;唐娇玉;杨海;...

期刊： 黑龙江畜牧兽医,2017年(3):267-269 ISSN：1004-7034

作者机构： 衡阳师范学院生命科学与环境学院;[唐小武] 湖南大北农农业科技有限公司;[周东升; 杨灿; 宾冬梅; 杨海; 唐娇玉] 衡阳师范学院

关键词： 动物生物化学;教研一体化;改革;二本院校;实验教学

摘要： 笔者针对二本院校科研经费相对薄弱的情况,以动物生物化学实验教学为例,探讨将教学科研结合的途径,通过教学内容整体化设计、教学过程全员参与、实验室全天开放三个途径进行改革,将学生的学习由被动接收转变为主动探究,在培养学生实践能力和有效减少科研经费、增强学生科研能力方面具有重要意义。

语种： 中文

作者： 王芳宇;周云;何丽芳;滕涛;杨海;...

期刊： 中国皮肤性病学杂志,2017年31(4):359-364 ISSN：1001-7089

作者机构： 衡阳师范学院生命科学与环境学院, 功能金属有机材料湖南省重点实验室, 湖南, 衡阳, 421008;Laboratory of Molecular and Functional Enzymology, UPMC-Sorbonne University, France, Paris, 75205;[王芳宇; 周云; 何丽芳; 滕涛; 杨海] 衡阳师范学院生命科学与环境学院, 功能金属有机材料湖南省重点实验室, 湖南, 衡阳, 421008;[谭潇] Laboratory of Molecular and Functional Enzymology, UPMC-Sorbonne University, France, Paris, 75205

关键词： CCR5基因;RNA干扰;人工miRNA

摘要： 目的构建人工miR-CCR5,并研究其对HIV-1感染宿主细胞的影响。方法以miR-155为基础骨架,根据HIV-1 CCR5基因序列设计并合成4对miRNA寡聚单链DNA,构建4个人工miR-CCR5。采用qPCR技术检测其对CCR5基因的沉默效率和对干扰素表达的影响;MTT法测定其对被转染细胞的毒性;抗HIV-1_(BaL)感染实验检测其对HIV-1感染的抑制作用。结果qPCR结果显示,4个人工miR-CCR5对CCR5基因都具有一定的沉默效果,其中miR-CCR54的沉默效率最高,达72% ;且不会对细胞干扰素的表达产生影响。MTT实验证实miR-CCR5-4不会影响被转染细胞的活性,此外,病毒抑制实验显示,miR-CCR5-4对HIV-1_(BaL) p24蛋白的抑制作用达70.48%,效果明显。结论所获得的miR-CCR5-4可为进一步的抗HIV-1_(BaL)感染研究提供基础。

语种： 中文

作者： 刘兆辉;唐姣玉;刘艳;王巧英;杨海;...

期刊： 黑龙江畜牧兽医,2017年(03):172-174 ISSN：1004-7034

作者机构： 衡阳师范学院生命科学与环境学院,湖南衡阳,421008;[周东升; 刘艳; 杨灿; 王巧英; 刘兆辉; 杨海; 唐姣玉] 衡阳师范学院

关键词： 大蒜素;湘黄鸡;热应激;生长性能;免疫功能

摘要： 为了研究大蒜素对30日龄热应激湘黄鸡生长性能和免疫功能的影响,试验将40只湘黄鸡随机分为4组,热应激组饲喂基础日粮,低剂量组、中剂量组、高剂量组分别在基础日粮中添加100,200,400 mg/kg大蒜素。结果表明:日粮中添加200,400 mg/kg大蒜素可促进30日龄热应激湘黄鸡体重的增长;添加200 mg/kg大蒜素能显著提高饲料利用率（P<0.05）;同时,在日粮中添加大蒜素可明显提高湘黄鸡胸腺指数以及增加血液中总蛋白和球蛋白含量。说明在日粮中添加大蒜素具有促生长和提高免疫功能的作用。

语种： 中文

作者： 唐青海;杨海;黎露;陈果亮;何丽芳;...

期刊： 中国畜牧兽医,2017年44(8):2261-2268 ISSN：1671-7236

作者机构： 衡阳师范学院生命科学与环境学院,衡阳 421008;衡阳师范学院生物药物研究所,衡阳 421008;衡阳师范学院湖南益豚生态农业有限责任公司联合研究中心,衡阳 421008;[何丽芳; 唐青海; 黎露; 王芳宇; 陈果亮; 杨海; 刘最] 衡阳师范学院

关键词： 猪流行性腹泻病毒;CH-HuN1301毒株;N基因;稳定细胞系

摘要： 本研究旨在建立猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）CH-HuN1301株N蛋白稳定表达细胞系。采用RT-PCR扩增PEDV新流行毒株CH-HuN1301株N基因,分别克隆至原核表达载体pET28a和真核表达载体pEGFP-C1构建重组表达载体,所测定的序列采用Mega 5.0软件进行进化分析。将原核表达的N蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,重组真核表达载体pEGFP-PEDV-N转染HEK293细胞,经用G418筛选获得稳定的表达细胞系。荧光倒置显微镜观察细胞荧光,免疫过氧化物酶单层细胞染色法（IPMA）检测N蛋白的表达。结果表明,PEDV HuN1301-14毒株N基因大小为1 323bp,原核表达重组N蛋白分子质量约60ku,其多克隆抗体与PEDV呈特异性反应,荧光倒置显微镜观察和IPMA检测结果显示N蛋白在HEK293细胞中稳定表达。该细胞系的建立为进一步研究PEDV的诊断方法提供了基础材料。

语种： 中文

发明/设计人： 唐青海;杨海;王芳宇;何丽芳;唐姣玉

申请/专利权人： 衡阳师范学院

申请/专利号： CN201710091326.3

申请时间： 2017-2-21

公开号： CN106728792A

公开时间： 2017-05-31

主申请人地址： 421002 湖南省衡阳市珠晖区衡花路16号

摘要： 本发明公布了一种治疗猪支原体肺炎的中药及使用方法,各组分和重量份为：麦门冬30#120份,天门冬30#120份,熟地黄30#120份,款冬花6#24份,川贝母6#24份,玄参15#60份,紫苏叶8#32份,茯苓15#60份,黄芩5#20份,甘草6#24份。使用时直接将各组分打成粉剂混合,每10公斤体重每天加入组方药粉剂量为60g#125g添加到饲料中,连用14d以上。本中药组方在饲料中添加,疗效显著,且无残留,无毒副作用,不会引起支原体耐药性。

作者： 刘倩;符潮;周传社;陈亮;杨海

期刊： 家畜生态学报,2017年38(2):83-87 ISSN：1673-1182

作者机构： 赣南师范大学生命与环境科学学院,江西赣州341000;衡阳师范学院生命科学与环境学院,湖南衡阳421008;赣南师范大学生命与环境科学学院,江西赣州,341000;中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室,湖南省畜禽健康养殖工程技术中心,农业部中南动物营养与饲料科学观测实验站,湖南长沙410125;湖南畜禽安全生产协同创新中心,湖南长沙410128

关键词： 反刍动物;瘤胃微生物;限制性氨基酸;代谢

摘要： 随着反刍动物新蛋白质体系的提出,氨基酸营养研究随之进入崭新的局面。尤其是针对蛋白质、限制性氨基酸和肽的代谢,合理搭配日粮氨基酸,以及提高饲料蛋白质消化率和氮利用率成为反刍动物营养研究领域的新热点。本文综述了反刍动物瘤胃微生物在不同日粮条件下的氨基酸限制性顺序,限制性氨基酸的研究方法,理想的氨基酸模式,蛋氨酸与赖氨酸的代谢机理,以及限制性氨基酸代谢的影响因素,旨在为揭示反刍家畜瘤胃微生物限制性氨基酸代谢机理,建立调控反刍家畜氨基酸高效利用的营养技术方案提供理论依据和技术支持。

语种： 中文

作者： 刘倩;杨海

期刊： 黑龙江畜牧兽医,2017年(9):25-27 ISSN：1004-7034

作者机构： 衡阳师范学院生命科学与环境学院,湖南衡阳421008;赣南师范学院生命与环境科学学院,江西赣州341000;[杨海; 刘倩] 衡阳师范学院

关键词： 丘陵地区;生态畜牧业;系统工程;发展策略;发展模式

摘要： 生态畜牧业发展的核心是实现养殖过程中的环境友好和畜产品优良。湘南地区由衡阳、郴州、永州三市组成,三地山河相连,地形地貌相似,生态条件相近,是湖南省丘陵地区发展生态畜牧业的优势区域。笔者对湘南地区畜牧业的现状进行调查分析,结合国内外生态畜牧业发展的先进模式,提出符合湘南丘陵地区生态畜牧业发展的基本策略,为政府部门和畜牧企业的转型发展提供决策参考。

语种： 中文

作者： 李晓楠;唐青海;李羽;王瑾;姚伦广;...

期刊： 河南农业科学,2017年46(8):131-136 ISSN：1004-3268

作者机构： 南阳师范学院, 河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室;[李晓楠; 唐青海; 李羽; 王瑾; 姚伦广; 阚云超] 昆虫生物反应器河南省工程实验室, 河南, 南阳, 473061;衡阳师范学院生命科学与环境学院/生物药物研究所, 湖南, 衡阳, 421008;[李晓楠; 唐青海; 李羽; 王瑾; 姚伦广; 阚云超] 南阳师范学院, 河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室;[杨海] 衡阳师范学院生命科学与环境学院/生物药物研究所, 湖南, 衡阳, 421008

关键词： 猪传染性胃肠炎病毒;分离培养;免疫过氧化物酶单层细胞染色法;S1基因

摘要： 采集1例疑似感染猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)仔猪的粪便,运用RT - PCR方法和血清学方法对病料进行TGEV检测,并应用猪睾丸细胞(ST)进行病毒分离培养,分别采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)和RT - PCR方法检测病毒在ST细胞中的增殖动态,应用RT - PCR方法扩增分离TGEV S1基因,经序列测定后,采用DNAStar 7. 0和Mega 5. 0软件对TGEV进行生物信息学分析。结果表明,病料接种到ST细胞培养后,出现明显细胞病变效应(CPE) ; RT - PCR检测结果显示,TGEV核酸阳性;血清学鉴定TGEV抗原阳性。将分离毒株命名为TGEV - NY。感染12 h后,IPMA检测结果阳性,且可从细胞培养上清中检出TGEV核酸。序列测定分析表明,分离毒株S1基因开放阅读框(ORF)为2 220 bp,编码740个氨基酸。进化分析显示,分离毒株与我国2006年分离的SC - Y毒株亲缘关系最近,分离毒株属于基因Ⅰ群。

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